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1.
毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨利用毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变的临床应用价值。方法:采用毛细管电泳作SSCP分析,检测20例结肠癌肿瘤标本p53基因第7外显子PCR扩增产物,并与传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果进行比较,最后用DNA序列测定判断其准确性。结果:20例结肠癌标本中,毛细管电泳技术检测出5例标本(Ca4,Ca6,Ca7,Ca8,Ca14)有突变,而凝胶电泳结合银染技术仅检出4例标本(Ca4,Ca6,Ca7,Cal4)有突变,测序证实经毛细管电泳所检出的5例标本均存在点突变。结论:对于PCR产物的单链构象多态性分析,毛细管电泳技术是一种更加快速、简便、敏感的方法,可应用于临床筛查基因点突变。 相似文献
2.
3.
HPLC法测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱中杂质 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立盐酸麻黄碱(E)和盐酸伪麻黄碱(PE)中杂质的高效液相色谱HPLC测定方法。方法用RPC18色谱柱,以20mmol/LKH2PO4水溶液-甲醇(96∶4)为流动相,检测波长为210nm,分析时间为20min。结果6种麻黄生物碱均达到基线分离;混合对照品连续进样6次,色谱峰面积RSD均小于1.0%;对照品质量浓度在选定范围内呈现良好的线性关系(R2>0.999);各成分最低检出限分别为:去甲基麻黄碱(NE)为0.05μg/mL,去甲基伪麻黄碱(NPE)为0.04μg/mL,E和PE为0.1μg/mL,甲基麻黄碱(ME)和甲基伪麻黄碱(MPE)为0.2μg/mL;各成分的加样回收率均大于97.1%;6个待测样品均被检测出不同程度的杂质。结论本方法分离度好、精密度高、专属性强、灵敏度高,可用于麻黄生物碱类药物中杂质成分的定性和定量测定。 相似文献
4.
5.
目的:建立复方芦丁片中芦丁在beagle犬血浆中含量测定的RP-HPLC法。方法:色谱柱为Merck C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸溶液(20∶80);流速1.0 mL.min-1;检测波长为360 nm;柱温25℃;进样量20μL。结果:芦丁峰形对称,血浆中内源性杂质不干扰芦丁的测定,保留时间在10分钟左右。血浆中平均回收率为98.92%~112.33%,芦丁最低检出量为0.18 ng。结论:RP-HPLC可用于犬血浆中芦丁的含量测定。 相似文献
6.
中药材定量分析中测量不确定度的评定方法及其影响因素的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨中药材定量分析中测量不确定度的评定方法及其影响因素,为中药材分析方法的研究及中药质量标准的制定提供理论依据。方法:利用中药材多指标成分定量测定的方法验证数据和样品代表性实验数据,通过不确定度来源分析,运用现代误差理论,探讨了中药材多指标成分高效液相色谱定量方法的测量不确定度的评定方法。结果:将该方法应用于人参、三七和丹参3种中药材指标成分定量分析的测量不确定度的评定,并分析了影响测量不确定度的因素。中药材的样品均匀性是影响中药材多指标成分分析的测量不确定度的主要因素。结论:以方法验证数据和样品代表性实验数据来评定中药定量分析中的测量不确定度,方法简便,其评定结果对于中药材分析方法的建立及中药质量标准的制定具有重要意义。 相似文献
7.
灯盏花素在家犬与家兔体内的药代动力学研究 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:研究灯盏花素在家犬与家兔体内的药代动力学.方法:采用液-液萃取法制备血样供试品,HPLC法测定.结果:灯盏花素在家犬体内的过程符合双室模型,主要药动学参数为:A=56.93±23.14,B=1.61±1.11,α=0.2328±0.1321min-,β=0.0255±0.0187min-,T1/2α=2.98±1.42min,T1/2β=27.14±14.35min,K21=0.0312±0.0112min-,K10=0.1904±0.1319min-,K12=0.0367±0.0306min-1,CL=39.41±20.44ml·min-,AUC=3074±1055mg·min·L-;灯盏花素在家兔体内的过程符合双室模型,主要药动学参数为:A=2.64±1.12,B=0.28±0.12,α=0.1439±0.0681min-,β=0.0162±0.0456min-,t1/2α=4.82±1.65min,t1/2β=42.66±18.77min,K21=0.0285±0.0147min-,K10=0.0820±0.00378min-,K12=0.0496±0.0241min-,CL=337.05±156.48ml·min-1,AUC=356±114mg·min·L-1.结论:灯盏花素在家犬与家兔体内半衰期很短,其作用时间短,消除速度快. 相似文献
8.
9.
传统的细胞培养是在方瓶和多孔板中进行的 ,而这种器皿所提供的环境与体内环境相去甚远。方瓶和多孔板 ,仅可以维持温度 ,PH值与容氧水平 ,而瓶内培养液同外界没有任何联系 ,即这是一个封闭体系。实际上体内细胞却可以和胞外环境进行着物质交换 ,这种体内环境和培养环境的巨大差异是造成中药细胞作用研究中常出现伪结果的重要原因。〔2~ 4〕而且 ,传统的培养方式需要人不断地干预 ,既辛苦又不方便控制 ,使得在这一步消耗了太多的精力。因此 ,我们着眼于更接近细胞实际生长环境的细胞培养装置 ,提出了细胞生物反应器的设计思路 ,利用计算机… 相似文献
10.
目的:研究糖尿病肾病不同中医辨证分型的患者中CDKN2A,CDKN2B,IGF2BP2和CD—KAL1基因的表达量。方法:提取血液样本中的mRNA,并以此为模板进行反转录得到cDNA,以Real—TimePCR方法测定目的基因的表达量。结果:建立了这4个基因的定量方法,测定了50例正常人和53例糖尿病肾病患者中的基因表达量。结论:本研究在糖尿病肾病不同中医辨证分型的患者中测定了4个基因的表达量水平,对这些基因的表达量与糖尿病肾病中医辨证分型的关系进行了研究,为糖尿病肾病中医的临床诊断提供了量化指标,并同时指出基因研究对于中医中药的临床诊断和治疗具有深远的意义。 相似文献